第五节　细胞粘附分子的检测

　　白细胞和血管内皮细胞、巨噬细胞和上皮细胞等以及血液中均存在细胞粘附分子。按其结构特1瀀，分有钙离子依赖性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和选择素家族四大类。在各种细胞因子、内毒素、凝血酶等作用下，细胞粘附分子由细胞内贮存池转移至细胞膜或合成增加，导致细胞表面的粘附分子数量增多。因此在某些疾病中细胞粘附分子的数量有改变。此外，细胞粘附分子经磷酸化、糖基化等修饰作用可发生构象改变，导致其亲和力和扩散速率改变而影响其功能，因此定量检测细胞粘附分子的数量、亲和力及扩散速率对探索某些疾病的发病机制、监视疾病的发生、发展过程和指导临床治疗有重要意义。目前的检测方法，大多限于用免疫学技术检测其数量，而有关分子的亲和力及扩散速率的检测正在建立中。

　　一、细胞表面粘附分子的检测

　　1．放射免疫测定法通常用抗细胞粘附分子抗体包被载体，加受检样品后，继加相应单克隆抗体和同位素标记的二抗作非竞争性固相放射免疫测定法。2．免疫荧光测定法除常规的间接免疫荧光法外，有条件的实验室，用不同激发波长的荧光素着染色受检细胞，在FACS仪上可同时检测有两种不同的细胞粘附分子。3．酶免疫测定法主要为双抗体夹心ELISA，本法应用最广，但仅能检出一群细胞的表面粘附分子数量，而不能反映单个细胞粘附分子数量的变化。

　　二、可溶性粘附分子的检测

　　多采用双抗体夹心ELISA，研究最多的选择素家和免疫球蛋白超家族。前者有E、L、P三型，均可见血液中。溶血性尿毒症和血小板减少性紫癜患者血液中，P选择素比正常人高2～3倍，而败血症、HIV感染和艾滋病患者血液中L选择素明显增高。血液中存在可溶性E选择素是内皮细胞激活的证据，败血症、糖尿病等患者血液中E选择素水平增高，一般与疾病的活动性无关，而与器官受损程度相关。如败血症患者，可溶性E选择素可增高20倍以上，据称与疾病的严重性或预后有关。肝炎、肝硬化等患者血液中超免疫球蛋白家族中ICAM-1水平增高，与肝功能损害指标相关。总之，现已发现许多疾病可见细胞粘附分子数量的异常，但这类工作尚处于探索阶段，有待深入研究和资料的积累才能判断其确切的临床意义。

（杨延彬）